郑州大学第二附属医院心血管内科   郑州 450014

背景和目的

急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）后心室重塑（ventricular remodeling）是心室大小、形态、结构和功能变化的过程，包括梗死区心肌坏死产生膨出，非梗死区心肌肥大和成纤维细胞的增殖及间质胶原的增生、纤维化，最终导致心力衰竭。肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin system，RAS）过度激活，循环和局部血管紧张素Ⅱ（angiotensin II，AngII）水平增加，既是心搏量下降时的一种代偿机制，又是心室重塑过程和疾病进展的主要机制。同时研究表明，骨桥蛋白（osteopontin，OPN）作为一种反应性物质，是近年发现的另一重要调控因子，在参与动脉粥样硬化和血管成形术再狭窄的过程中，OPN基因表达显著上调，能刺激血管内皮细胞和平滑肌细胞过度增殖，导致细胞外基质合成增加，降低了血管的顺应性。在AMI后，OPN及整合素合成增加，可能调节成纤维细胞增殖、迁移和分泌I型胶原和Ⅲ型胶原等大分子物质，进一步加重心室重塑，具体机制不清，国内也未见文献报道。在防治AMI过程中，他汀类药物即3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG-CoA）还原酶抑制剂，如新一代阿托伐他汀主要通过明显降低高胆固醇血症、抗炎、保护血管内皮，稳定粥样斑块，减少冠脉事件，防止心力衰竭发生。他汀类药物能改善心肌梗死后心力衰竭大鼠模型左室重塑和功能。而针对他汀类药物对大鼠AMI后Ang II、OPN基因与胶原重塑的影响尚未见报道。本实验的目的在于：通过建立大鼠心肌梗死模型，观察AMI后AngII和OPN基因的变化及它们之间的相互关系，初步探讨心室重塑可能机制；观察阿托伐他汀对大鼠AMI后心室重塑和心功能的影响，为探讨他汀类药物改善AMI后心室重塑提供新的实验依据。

方法

 1.  心肌梗死模型制作和分组  健康清洁级雄性Wistar大鼠60只，体重240±20g，随机分为假手术组（Sham，n=10）和AMI组（n＝50）；AMI组通过结扎左冠状动脉前降支（LAD）制作AMI模型成功2h后剩余36只，再随机分为梗死对照组（MI-C，n=18）和阿托伐他汀干预组（MI-A，n＝18）。MI-A组每日给以阿托伐他汀（40mg/kg）灌胃，持续4周，Sham组和MI-C组每日给以等量生理盐水灌胃。

 2.  血流动力学评价心功能  大鼠麻醉后，右侧颈总动脉插管，多导电生理记录仪记录心率（HR）、动脉收缩压（SBP）、动脉舒张压（DBP）、左室收缩压（LVSP）、左室舒张木压（LVEDP）等指标。

 3.  组织学与免疫组织化学染色检测心肌组织   石蜡包埋后连续切片，分别行HE染色及脱蜡水化，滴加稀释的一抗、二抗，用DAB显色封片。采用图像分析软件在显微镜下分析，镜下观察棕黄色为阳性。

 4.  Ang II测定  抽血2m1按要求低温离心，取上清液待测；左室非梗死区心肌按要求研磨成匀浆，煮沸、低温离心后，取上清液采用放射免疫法测定血浆和心肌中AngII浓度。

 5.  RT-PCR法检测心肌0PN mRNA的表达  取左室非梗死区心肌提取RNA，逆转录成cDNA，进行聚合酶链反应。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，照相，计算机扫描，以每例标本OPN与GAPDH电泳带灰度值之比作为该例标本目的基因表达的相对数值。

结果

 1.  一般情况4周后，各组大鼠分别为：Sham组10只、MI-C组13只、MI-A组15只，3组体重无显著性差别（均P>0.05）。MI-C组和MI-A组心脏重量、左心室重量、心脏重量/体重和左心室重量/体重均明显高于Sham组（P均<0.05），而MI-A组显著低于MIC组（P均<0.05）。

2.  血流动力学结果  MI-C组和MI-A组与Sham组相比，HR无显著变化（P>0.05）；LVEDP明显升高(P<0.05)；SBP、DBP、 LVSP显著降低（P<005）。MI-A组LVEDP显著低于AMI对照组（P<0.05）；SBP、DBP、 LVSP显著高与MI-C组（P<0.05）。

 3.  AngII、OPN基因和I型胶原蛋白的表达MI-C组、MI-A组与Sham组相比，左室非梗死区I型胶原、血浆及心肌中AngII、OPN mRNA的表达均明显增高(P均<0.05)，而MI-A组上述指标均明显低于MI-C组(P均<0.05)。

 4.  直线相关分析  MI-C组和MI-A组血浆和心肌组织中AngII浓度、左室非梗死区中OPN mRNA的变化均与呈I型胶原呈正相关(P均<0.05)；MA-C组和MI-A组血浆和心肌组织中AngII浓度也均与左室非梗死区中OPN mRNA的变化呈正相关(P均<0.05)。

结论

 1.  AngII和OPN基因在大鼠心肌梗死后早期表达显著增高，并参与心室重塑机制的发生、发展过程。

 2.  阿托伐他汀可下调大鼠心肌中AngII和OPN基因的表达，抑制A型胶原的合成及改善血流动力学。

 3.  阿托伐他汀能够抑制心肌梗死后心室重塑，改善心功能与下调AngII和OPN的表达有关。

关键词   急性心肌梗死；心室重塑；血管紧张素Ⅱ；骨桥蛋白；阿托伐他汀