焦昆立   赵洛沙

郑州大学第一临床医学院心血管内科    郑州 450052

背景  冠心病（coronary heart disease，CHD）是严重危害人们健康的一种常见病、多发病，其发病机制尚不十分清楚。目前认为可能是多种因素作用于不同环节的结果。研究中许多CHD患者发病并不伴有传统危险因素，如糖尿病、高血压、高脂血症及吸烟，却发现血浆同型半胱氨酸（homocysteinc，Hcy）水平升高。因此Hcy在心血管疾病的发生发展中的作用越来越受到人们的关注，高同型半胱氨酸血症（hyperhomocysteincmia，HHcy）可能是引起CHD发生的独立危险因素。Hcy是蛋氨酸代谢过程中的关键中间产物。蛋氨酸代谢中酶或辅助因子缺乏均可引起HHcy进而导致心血管疾病的发生。N₅，N₁₀亚甲基四氢叶酸还原酶（N₅N₁₀-Methylenetetrahy drofolatc Reductasc，MTHFR）、蛋氨酸合成酶（methioninesynthetasc，MS）及胱硫醚-β合成酶（cystathionine β-synthase，CBS）均为蛋氨酸代谢过程中的关键酶。三种酶基因错义突变是引起该酶缺乏或活性降低的主要机制之—。目前国内外对中国人基因多态性与CHD关系的研究存在地域差异、样本量少等条件限制。

目的  本研究通过检测Hcy相关代谢酶MTHFR C677T、CBS 844ins68、MS A2756G基因位点突变，初步探讨河南汉族人群MTHFR、MS、CBS基因多态性与CHD，心肌梗死（myocardia1 infarction，MI）及冠状动脉病变支数的关系。

对象和方法  研究对象包括经临床症状、实验室检查和冠状动脉造影证实的208例CHD患者（患者组）和经门诊体检健康的500例健康人（正常对照组）应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性（polymerase chain reaction and restrction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）技术，检测MTHFR C677T、MS A2756G基因多态性，聚合酶链反应（PCR）产物直接凝胶电泳检测CBS 844ins68基因多态性。应用SPSS11.0统计学软件进行数据处理分析。

结果

1.  MTHFR基因第677位核苷酸可分为3种类型：CC、CT、TT。患者组3种基因型频率分别为15.4％、45.7％、38.9％，T等位基因频率为61.75％，C等位基因频率为40.63％；正常对照组分别为35.6％、44.0％、20.4％，T等位基因频率为42.40％，C等位基因频率为57.60％。组间各基因频率及等位基因频率比较差异均具有统计学意义（P＜0.05＝。 677 TT基因型对CHD中比值比（OR）为2.489（95％CI为1.748~3.544），对MI的OR为2.584（95％CI为1.695~3.938），与CHD、MI有重要相关性。

2.  CBS 844ins68的基因型为D/D野生型、D/I杂合型、I/I突变型。患者组分布频率为D/D 88.46％ D/I＋I/I 11.54％，D等位基因频率为93.99％，I等位基因频率为6.01％；与正常对照组的D/D 92.6％ D/I＋I/I 7.4％，D等位基因频率为96.1％，I等位基因频率为3.9％，差异无明显统计学意义（P>0.05），D/I＋I/I对CHD OR为l.632（95％CI为0.950~2.805），对MI OR为1.871（95％CI为0.904~3.489），提示可能CBS 844ins68不是发病的直接相关因素，两者之间不具有明显相关性。

3.  MS A2756G的基因型为AA野生型、AG杂合型、GG突变型。患者组分布频率为AA 81.25％、 AG＋GG 18.75％，A等位基因频率为90.38％、C等位基因频率为9.62％；与正常对照组的AA 83.8％ AG＋GG 16.2％，A等位基因频率为91.7％，G等位基因频率为8.3％，差异无明显统计学意义（P>0.05）。AG＋GG对CHD OR为1.194（95％CI为0.783~1.820），对MI OR为1.127（95％CI为0.671~1.893），提示可能MS A2756G不是发病的直接相关因素，两者之间不具有明显相关性。

4.  多基因联合分析示MTHFR 677TT与CBS 844ins68 D/I基因型可增加患病风险：TT＋D/I变异对CHD OR为3.340（95％CI 1.385~8.053），对MI OR为4.828（95％CI 1.917~12.157），具有明显的差异。CBS 844ins68 D/I本身可能是协同作用，而在MTHFR 677TT与MS A2756G、CBS 844ins68与MS A2756G及三基因联合分析均未见和CHD、MI有明显相关性。

5.  单基因变异和多基因联合变异:均未见和冠状动脉病变支数有明显相关性(P>05)。

结论

1.  在河南汉族人群中，MTHFR C677T基因多态性可能是CHD和MI发病机制中的一个重要危险因素，但与冠状动脉病变支数无明显相关性。

2.  在河南汉族人群中， CBS 844ins68基因多态性可能不足以构成CHD和MI发病机制中的一个独立危险因素，与冠状动脉病变支数无明显相关性。

3.  在河南汉族人群中，MS A2756G基因多态性可能不足以构成CHD和MI发病机制中的一个独立危险因素，与冠状动脉病变支数无明显相关性。

4.  在河南汉族人群中，MTHFR 677TT＋CBS 844ins68 D/I可增加患病风险，CBS基因起协同作用，而其他联合基因无明显相关性。联合基因变异均与冠状动脉病变支数无明显相关性。

5.  在河南地区汉族人中，MTHFR C677T、CBS 844ins68、MS A2756G分布与其他地域、人种有一定差异，特别是和国外比较，高低差异较大，可能是出于地域人种及样本量不同的原因。

关键词：同型半胱氨酸；亚甲基四氢叶酸还原酶；胱硫醚β合成酶；蛋氨酸合成酶；多态性